信阳细胞培养箱厂商:细胞培养基厂家

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细胞培养步骤

细胞培养是在实验室中通过人工方法培育和繁殖细胞的过程,细胞培养的一般步骤包括:细胞株选择准备、培养基配制和消毒、细胞接种、培养条件控制、细胞培养和维护、细胞检测和鉴定。

细胞复苏 将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10mlDMEM培养基清洗,弃上清液。

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将细胞转移到一15ml Falcon管中;加入5ml ES培养基(用培养基冲洗冻存管);离心3分钟;弃上清,用2ml ES培养基重悬细胞,至少吹打10次;接种在明胶包被(见下文)的6孔或6cm组织培养皿;孵育。

细胞培养常用器材有哪些?

1、细胞培养中需用多种金属器材,用于解剖、取材、剪切组织及持取物件等,常用的有剪刀、镊子、手术刀、解剖刀、血管钳、组织镊、眼科镊及各种型号针头等。

2、用到的器材:就是CO2培养箱,超净工作台,离心机,培养皿(或培养瓶),移液枪,操作中主要注意无菌操作。还有胰酶消化时间,离心转速 等。

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3、细胞培养板(我们自己常用的有96空、24孔、6孔,当然还有其他的规格,可以根据需要选择)。

4、培养室的设备:液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统低温冰箱(-80℃)、空调二氧化碳缸瓶、边台(书写实验记录)。

5、培养瓶(按底面积的大小分为很类别),培养皿(按底面积的大小分为很多类别),培养板(一般有6孔板,12孔板,24孔板和96孔板)具体使用那种看你的需求了,与细胞种类关系一般不大。

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细胞培养基使用前预热,哪种方法更好

1、一般认为:预热对细胞有好处, 不预热影响也不大;但是为了保证实验的稳定性,对细胞温柔一点。还是统一预热吧。

2、细胞培养基中有许多热不稳定的成分,必须低温保存,但是培养基在接触细胞以前必须要事先预热到37℃,千万不要把冷的培养基加入细胞内。

3、为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度—-196℃,将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲亚砜或甘油)的培养基,以一定的冷却速度冻存,最终保存于液氮中。

4、一般培养基可***用121℃ 高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中,如无特殊规定,即可用此法灭菌。

5、配制培养基最好使用新制备的三蒸水,不是娃哈哈水,一般在试验前当天或前一天制备为好。调节 pH值的酸碱溶液也应该使用这种水配制。

6、培养液配制前,先将配置培养基所用的水和瓶子高温高压灭菌,我们这里是配置用灭菌水配置DMEM,调好pH值,在用0.22um滤膜过滤,在加如FBS,细胞因子等东西。最终用的干细胞培养基是不能高温高压灭菌的。

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标签: 细胞 培养基 实验室

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